Перспективы регуляции процесса апоптоза в фармакологических целях, а также механизмы его регуляции и их изучение

Главная страница
Контакты

    Главная страница



Перспективы регуляции процесса апоптоза в фармакологических целях, а также механизмы его регуляции и их изучение



страница6/11
Дата12.01.2017
Размер1.94 Mb.
ТипРеферат


1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   11

Таблица 2.
С помощью спектрофотомерии мы увидели, что светосумма в районе 695 нм уменьшается, что может говорить об изменении конформации белковой молекулы.

Чтобы подтвердить то, что SDS действительно изменяет конформацию цитохрома, мы использовали метод флуориметрии.



Метод флуориметрии чем-то схож с методом спектрофотометрии, но отличие в том, что измеряется количество света, которое выделило само вещество под действием на него световых лучей, которые попали в кювету с исследованным веществом из источника света. Свет, который испускается источником света, на приёмник не попадает. Принцип флуориметрии показан на рисунке 6:





Рисунок 6. Основные принципы флуориметрии.

Все эти схемы показывают основные принципы флуориметрии (Ю.А.Владимиров, Е.В.Проскурнина. Лекции по медицинской биофизике//издательство МГУ//Москва.2007.



Но при этом при разных длинах волн интенсивность флуоресценции меняется, и у разных веществ частота электронного возбуждения разная. У триптофана – это начальная ультрафиолетовая область спектра.

Методом рентгеноструктурного анализа было выяснено, что у цитохрома ц рядом с активным (гемовым) центром находится аминокислота триптофан, (картинка с формулой триптофана взята из сайта http://www.fizlabpribor.ru/Cas/153_94_6.php?NF=1) которая в первичной структуре белка имеет положение 59 (Silke Oellerich, Hainer Wackerbarth, Peter Hildebrandt. Conformational equilibria and dynamics of cytochrome C induced by binding of sodium dodecyl sulfate monomers and micelles//Eur Biophys Journal (2003) 32. pages 599-613). SDS при действии на цитохром ц будет изменять его конформацию, и при этом триптофан отдалится на некоторое расстояние, и под действием ультрафиолетовых лучей в результате чего электроны перейдут на более высокий уровень, а затем, в результате интерконверсии произойдет испускание кванта света (Ю.А. Владимиров. Свечение, сопровождающее биохимические реакции//Биология//соровский образовательный журнал, №6, 1999 стр.25-32). Без SDS этого свечения нет, так как молекула триптофана находится очень близко к молекуле железа, и железо берёт УФ-лучи на себя. Результаты эксперимента представлены на диаграмме 7. По данным, полученным по диаграмме 7, построим таблицу (таблица 3) и диаграмму (диаграмма 8) зависимости интенсивности флуоресценции от концентрации SDS, содержащегося в растворе с цитохромом ц. При нахождения светосуммы мы пользовались тем, что по определению интеграл от функции даёт нам значение площади под кривой, которая, в нашем случае, равна светосумме, так как по оси ординат у нас отложены величины, эквивалентные количеству света.

Таблица 3.

Относительная концентрация SDS


Светосумма флуоресценции

0

0.130011765

3

0.123817647

10

0.123364706

20

0.126635294

30

0.129158824

50

0.1639

75

0.200682353

100

0.204494118

120

0.213376471

150

0.221652941

200

0.232947059

300

0.247023529

400

0.270664706

600

0.270388235

700

0.2801




Каталог: fileadmin -> rsmu -> img -> mbf -> cmfrb -> documents -> referati
referati -> Реферат: острая и хроническая почечная недостаточность. Механизмы повреждения почек. Подходы к лечению
referati -> Реферат по фармакологии студентки 471 гр. Воробьёвой Ольги. 2008г. Содержание: Общая информация
mbf -> Комплексные числа
mbf -> Рабочая программа учебной дисциплины общая патология направление подготовки (специальность) 060601 Медицинская биохимия
mbf -> Рабочая программа учебной дисциплины «Физиология с основами анатомии»
mbf -> Рабочая программа учебной дисциплины нормальная физиология наименование учебной дисциплины
mbf -> Программа спецкурса по выбору название курса Медицинские нанобиотехнологии Специальность Медицинская биохимия
mbf -> Рабочая программа учебной дисциплины общая патология направление подготовки (специальность) 060602 Медицинская биофизика
mbf -> Министерство здравоохранения и социального развития
1   2   3   4   5   6   7   8   9   10   11

  • Рисунок 6. Основные принципы флуориметрии.
  • Таблица 3 . Относительная концентрация SDS