Показатели апоптоза при герпетической и папилломавирусной инфекциях

Главная страница
Контакты

    Главная страница



Показатели апоптоза при герпетической и папилломавирусной инфекциях



страница12/15
Дата12.01.2017
Размер2.31 Mb.
ТипОтчет


1   ...   7   8   9   10   11   12   13   14   15

5.2 Показатели апоптоза при герпетической и папилломавирусной инфекциях




5.2.1 Cывороточные показатели апоптоза при герпетической и папилломавирусной инфекциях

Нарушение реализации апоптоза является также основой формирования хронических инфекционных процессов, в том числе и вирусной природы Внедрение вируса в клетку макроорганизма — это, прежде всего, «сигнал тревоги», активизирующий врожденные механизмы, направленные на элиминацию инфектогена, среди которых ключевую роль играет гибель инфицированных клеток. Участие апоптоза в удалении вируссодержащих клеток имеет важное биологическое значение, поскольку фрагментация ДНК предупреждает перенос генетического материала в другие интактные клетки. Показано, что при вирусных инфекциях сосуществуют факторы, индуцирующие и ингибирующие программированную клеточную смерть. Вирусная интервенция индуцирует активацию элиминирующих защитных реакций организма, биологическим смыслом которых является удаление вируса и зараженных им клеток как генетически чужеродного объекта. Иммунный ответ против внутриклеточных вирусов связан с активацией цитотоксических Т-лимфоцитов, распознающих инфицированные клетки по представленным вирусным пептидам и убивающих их, индуцируя цитолиз или апоптоз. В интересах вируса — подавить апоптоз и сохранить жизнеспособность клетки. Таким образом, исход инфекционного процесса связывают с результатом противостояния антиапоптотической способности вирусов и активации физиологической гибели инфицированной клетки как части защитного механизма организма. Ответственным за нарушение генетического контроля клеточного цикла может стать интеграция вирусного генома в геном клетки-мишени. Подобными свойствами обладают ДНК-содержащие, к которым относятся в том числе герпесвирусы, вирус папилломы человека.



Существует несколько механизмов запуска апоптоза в том числе через рецепторы к иммуноцитокинам (ФНО-α) и через специфические рецепторы «смерти». Рецепторы cмерти (death receptors) представляют собой трансмембранные гликопротеиды, которые, взаимодействуя со специфическими лигандами, передают апоптотический сигнал в клетку и вызывают активацию каспаз. Fas способен запускать в клетке апоптоз при взаимодействии с Fas-лигандом (FasL). Представляя собой трансмембранный белок, FasL может существовать и в растворимой форме (sFasL), отщепляющейся от мембранного Fas (mFasL) с помощью металлопротеиназы. Как представлено на рисунке 5 при ВПГ 1,2- инфекции отмечалось повышение уровня sFasl в момент рецидива при: легкой степени на 42%, средней степени тяжести на 35%, тяжёлой степени на 26%.

Рисунок 5 –Растворимый sFas в сыворотке крови пациентов с герпетической инфекцией.

Через 30 суток, на фоне проводимой терапии, уровень sFasl значительно снизился, но превышал уровень контрольной группы (р<0,01). При ЦМВИ в момент рецидива значение sFasl на 75% выше уровня контрольной группы и сохраняет свой уровень повышенным на 15% через 30 суток с момента лечения (р<0,01). Таким образом, при различных типах герпетической инфекции активируется способность организма элиминировать вирус. В тоже время способность в апоптозу при тяжелых формах ВПГ-1,2 инфекции меньше, чем при более легких формах (средней и легкой степени тяжести).

Для папилломавирусов доказана их способность индуцировать образование неопластических процессов у человека. На основании этой способности их принято подразделять на разновидности низкого (3,6,11,13,32,34 тип), среднего (30,35,45,52,53) и высокого (16,18,31,33,39,50,59) онкогенного риска. В последнее время с раком цервикального канала шейки матки связывают около 20 типов ВПЧ. Наиболее часто среди них выявляются ВПЧ-16 и 18 типов. Обращают на себя внимание данные, полученные при исследовании сыворотки крови пациентов ВПЧ с разной степенью онкогенного риска. Так, при ВПЧ-16,18 типа sFasl в момент рецидива снижен на 22% по сравнению с донорской группой (рисунок 6) .


Рисунок 6 – Растворимый sFas в сыворотке крови пациетов с папиломавирусной инфекцией.


Через 30 суток с момента лечения изменений не отмечалось. Сниженное количество sFas приводит к уменьшению возможности клетки запустить апоптоз и, таким образом, увеличению «живучести» интрегративных вирусов. Возможно, одним из механизмов антиапоптической активности является описанная в литературе способность папилломавирусов взаимодействать с геном р53 и подавлять транскрипционную активность белков, входящих в состав Fas. В случае инфицирования ВПЧ низкого онкогенного риска (10,13 типы) на фоне комплексной терапии (на 30 сутки) уровень sFas приближался к норме(рисунок 7).

Рисунок 7 – Фактор некроза опухоли-α (ФНО-α) в сыворотке крови пациетнов с герпетической инфекцией.



TRAIL (Apo2L) (tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand), это лиганд DR3 и DR5 [Reed J.C., 2002]. Так же как и CD95L, Apo2L запускает быстрый апоптоз во многих злокачественных линиях клеток [Bodmer J.2004 , Huang X., 2002 , Norris J.S., 2001]. В случае хронических вирусных инфекций с высоким онкогенным риском роль TRAIL и участие этого рецепторного пути в активации апоптоза не ясно.

Рисунок 8 – Фактор некроза опухоли-α (ФНО-α) в сыворотке крови пациентов с папиломовирусной инфекцией.

Сывороточные концентрации TRAIL в изученных группах пациентов оказались близки к нормальным значениям лишь в группе больных с ВПЧ низкого онкогенного риска и в группе пациентов с ВПГ-1,2 легкой степенью тяжести и ЦМВИ. Обращают на себя внимание выявленная тенденция к снижению TRAIL в сыворотке крови в случаях с более тяжелым течением инфекционного процесса (таблица 20). Резко сниженные показатели у пациентов с ВПЧ высокого онкогенного риска приводят к заключению о том, что отсутствие TRAIL-рецепторного апоптоза может быть одной из причин онкогенеза.

Другими регуляторами процессов апоптоза являются цитокины. Известно, что фактор некроза опухолей (ФНО) продуцируется активированными макрофагами и Т-лимфоцитами в ответ на антигенную стимуляцию. Действие ФНО на клетку неоднозначно. На одни клетки основным эффектом ФНО является активация транскрипционных факторов NF-kB и JNK (C-JUN NH2-terminal kinase), ведущих к индукции провоспалительных и иммуномодулирующих генов. В других клетках активация ФНО ведет к запуску программированной клеточной гибели.


Таблица 20 - Показатели содержания TRAIL в сыворотке крови у больных хроническими герпетическими и папилломавирусными инфекциями, (пкг/мл).

группа пациентов

при поступлении

Через 30 суток

ВПГ-1,2

1

189,5±13,0

157,5±16,01,2

2

154,5±13,01

105,0±9,21,2

3

129,0±13,01

100,0±6,01,2

ЦМВИ

179,5±10,0

180,5±15,0

ВПЧ

высокого онкогенного риска

90,0±16,01

60,0±10,01

низкого онкогенного риска

180,0±14,0

190,0±15,0

доноры

199±5,3

-

Примечания к таблице:

1 - достоверность различий по отношению к показателям доноров, р<0,001 ;

2- достоверность различий по отношению к показателям предыдущего периода, р<0,001.
Обнаружили, что при ВПГ1,2 и при ЦМВ инфекции уровень ФНО-α в момент рецидива значительно повышался, сохраняясь высоким через 30 суток с момента лечения рис.5. Значения ФНО-α коррелировали со степенью тяжести заболевания при ВПГ-1,2 типа (k-0,85).

При ВПЧ высокого и низкого онкогенного риска ФНО-α повысился на 90% и 94%, соответственно, достоверного снижения ФНО-α на фоне комплексной противовирусной терапии не зарегистрировано.

Таким образом, среди всех изученных групп пациентов наиболее снижена возможность организма элиминировать интегративный вирус ВПЧ с высоким онкогенным риском 16,18 типа, что выявлено по сниженному уровню растворимого лиганда к sFas-рецептору и TRAIL. ФНО-α зависимые пути противовирусной защиты активированы во всех исследуемых группах больных с хроническими вирусными инфекциями, при этом уровень ФНО-α является показателем активности воспаления и коррелирует с тяжестью течения инфекционного процесса. что позволяет использовать его в качестве диагностического критерия при скрытых инфекциях.


1   ...   7   8   9   10   11   12   13   14   15