Отчет о выполнении 1 этапа Государственного контракта

Главная страница
Контакты

    Главная страница



Отчет о выполнении 1 этапа Государственного контракта



страница1/15
Дата12.01.2017
Размер2.31 Mb.
ТипОтчет


  1   2   3   4   5   6   7   8   9   ...   15
УДК 616.988

ГРНТИ 76.03.31, 76.03.55, 76.29.50

Инв. №


ПРИНЯТО:

УТВЕРЖДЕНО:

Приемочная комиссия Государственного заказчика

Государственный заказчик

Федеральное агентство по образованию


От имени Приемочной комиссии

_____________________/Е.П. Попова/


От имени Государственного заказчика

____________________/ Е.Я. Бутко/


НАУЧНО-ТЕХНИЧЕСКИЙ

ОТЧЕТ


о выполнении 1 этапа Государственного контракта

П1084 от 24 августа 2009 г. и Дополнения №1-П1084 от 23 октября 2009 г.




Исполнитель: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кабардино-Балкарский государственный университет им. Х.М. Бербекова»


Программа (мероприятие): Федеральная целевая программа «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 гг., в рамках реализации мероприятия № 1.3.1 «Проведение научных исследований молодыми учеными-кандидатами наук»

Проект: «Молекулярные основы регуляции программированной гибели клеток при хронических онкогенных вирусных заболеваниях»

Руководитель организации: ______________________Б.С. Карамурзов

м.п.

Руководитель проекта: ________________________ А.А. Шевченко





Согласовано:

Управление научных исследований и инновационных программ

От имени Заказчика
_______________________/Кошкин В.И./



Нальчик

2009 г.
Список исполнителей


Научный руководитель,
с.н.с. УНИИД КБГУ, к.б.н.

20.10.2009



Шевченко А.А.

(Реферат, введение, главы 1-5, заключение)



Исполнители







Заведующая кафедрой микробиологии, вирусологии и иммунологии КБГУ.д.м.н., профессор

20.10.2009



Хараева З.Ф.

(Главы 1-5, приложение 2)



Профессор кафедры инфекционных болезней КБГУ, д.м.н., профессор

20.10.2009



Иванова М.Р.

(Главы 1-5)



Ассистент кафедры терапевтической стоматологии КБГУ

20.10.2009



Мизиева С.М.

(Главы 1-5)



Аспирант КБГУ

20.10.2009



Жемухова Р.Х. (Главы 1-5)

Студент КБГУ

20.10.2009



Мусуков Б.М.

(Главы 1-5)



Студент КБГУ

20.10.2009



Хосаев Д.Ю.

(Главы 1-5)



Начальник патентного отдела КБГУ

20.10.2009



Искакова Г.А. (Приложение 1)

Нормоконтролер,

начальник ОСМО


20.10.2009



Кольченко Е.А.


Реферат
Отчет 228 с., 1 ч., 8 рис., 24 табл., 280 источников, 2 прил.

АПОПТОЗ, ВИРУСНЫЕ ГЕПАТИТЫ, ГЕРПЕТИЧЕСКАЯ ИНФЕКЦИЯ, ПАПИЛЛОМАВИРУСНАЯ ИНФЕКЦИЯ, ОНКОГЕННЫЙ РИСК


Программируемая клеточная гибель или апоптоз является важнейшим механизмом контроля клеточной популяции в многоклеточном организме. Вирусы способны оказывать иммуносупрессивное действие, направленность которого может быть связана как с клеточным иммунитетом, так и с нарушением синтеза цитокинов и снижения апоптической активности зараженных клеток [Alonso С.L. 2004; Ambar B.B. 1999; Hardwick J.M. 2001; Hoetelmans R.W. 2000]. Особенно актуальной является проблема развития процесса вирогении в случае таких хронических вирусных инфекций как вирусные гепатиты В, С, герпетические инфекции, когда, несмотря не отсутствие активной репликации вируса, клетки макроорганизма «заражены» геномом вируса. Перспективной задачей современной иммунологии является поиск путей модуляции механизма работы клеток в направлении регуляции апоптоза.

Целью исследования было изучение маркеров апоптоза в сыворотке крови и других биологических жидкостях при хронических вирусных инфекциях с высоким онкогенным риском.

Для оценки активности апоптоза были исследованы ФНО-зависимые лиганды TRAIL, sFAS, ФНО-α у пациентов с хроническими гепатитами с парантеральным механизмом инфицирования, хроническими герпетическими инфекциями (ВПГ-1,2, ЦМВИ), папилломавирусной инфекцией разного онкогенного риска. Показатели изучались в сыворотке крови и отделяемом половых органов.

Проведено сравнительное исследование активности показателей апоптоза при различных вирусных инфекциях и в различном биологическом материале. Определены нозологические формы с наиболее выраженным снижением апоптоза, определены перспективные направления дальнейшего поиска причин нарушения противовирусной защиты, с целью использования в качестве прогностических, диагностических критериев и с целью выбора методов терапии.



Содержание


Введение 7

Глава 1 Аналитический обзор 9

1.1 Роль апоптоза в физиологических и патологических процессах 9

1.2 Морфологические изменения при апоптозе 11

1.3 Формирование в цитоплазме полостей и апоптотических телец 14

1.4 Механизмы апоптоза 16

1.4.1 Стимулы и сигнальная передача программы апоптоза 16

1.4.1.1 Рецепторы и лиганды клеточной гибели 16

1.4.1.2 Митохондриальный путь апоптоза 21

1.4.1.3 Сфингомиелиновый сигнальный путь 24

1.4.1.4 Взаимодействие различных путей апоптоза 26

1.4.1.5 Эффекторная фаза апоптоза и разрушение клеточных белков: каспазы 28

1.4.2 Протеинкиназы в механизме апоптоза 30

1.4.2.1 Митоген-активируемая протеинкиназа 30

1.4.2.2 Фосфатдилинозитол 3’-киназа (PI3-K) и Akt 31

1.4.3 Белки – регуляторы апоптоза 33

1.4.3.1 Представители семейства Bcl-2 33

1.4.3.2 ВН3-белки 36

1.4.3.3 Проапоптотические белки, высвобождаемые дестабилизированными митохондриями 38

1.5 Генетический контроль апоптоза, генетическая регуляция апоптозной активности 39

Глава 2 Выбор и обоснование оптимального варианта направления исследования 41

2.1 Апоптоз при вирусных парентеральных гепатитах 42

2.2 Апоптоз при герпетических и папилломавирусных инфекциях 55

Глава 3 План проведения экспериментальных и теоретических исследований 66

Глава 4 Экспериментальные и теоретические исследования 68

4.1 Клинико-эпидемиологическая и лабораторная характеристика обследованных групп больных хроническим вирусным гепатитом В, С 68

4.1.2 Клинико-эпидемиологическая и лабораторная характеристика обследованных групп больных герпетической инфекцией (вирус простого герпеса -1,2 типа и цитомегаловирусная инфекция) 88

4.2 Лабораторные методы исследования 92

4.2.1 Метод определения sFAS 92

4.2.2 Ход определения содержания TRAIL-связанного апоптоз 94

индуцирующего лиганда 94

4.2.3 Определение фактора некроза опухоли α(ФНОα) в сыворотке крови 95

Глава 5 Результаты исследований 97

5.1 Cывороточные показатели апоптоза при парентеральных гепатита 97

5.2 Показатели апоптоза при герпетической и папилломавирусной инфекциях 102

5.2.1 Cывороточные показатели апоптоза при герпетической и папилломавирусной инфекциях 103

5.2.2 Показатели апоптоза в отделямом половых органов при герпетической и папилломавирусной инфекциях 109

Заключение 114

Список использованных источников 121

Приложение 1 Отчет о патентных исследованиях 148

Приложение 2 148

Введение

Программируемая клеточная гибель или апоптоз является важнейшим механизмом контроля клеточной популяции в многоклеточном организме. Наиболее хорошо изучена последовательность событий, приводящих клетку к апоптозу в результате взаимодействия белков из семейства фактора некроза опухоли (ФНО) со специфическими рецепторами [Lorenz H.M. 2000; Reed J.C. 2002; Shigekazu N. 1997; Vaux D.L. 1997; Wang X. 2001]. Ярким представителем этой группы белков является система Fas/Fas-L. Fas-L является цитокином из ФНО-семейства, экспрессируется на поверхности различных клеток, в том числе на активированных Т-лимфоцитах и натуральных киллерах [Al Maini M.H. 2000; Aral H. 1997; Bamberger A.M. 1997; Holler N. 2003; Kang S. M. 1999; Kawaguchi Y. 1999]. Возможным механизмом «Fas-рецепторной недостаточности» при вирусных хронических инфекциях является увеличение содержания растворимого Fas26 рецептора (sFas), продукта альтернативного сплайсинга mРНК FasR и протеолитического отщепления трансмембранного FasR.

ФНОα - один из основных цитокинов, способных оказывать прямое повреждающее действие на клетки-мишени и лизировать клетки, инфицированные вирусом, является необходимым и в то же время достаточным индуктором местных и системных воспалительных реакций [Кетлинский С.А. 1997; Козлов В.А. 2002; Новиков В.В. 2005]. ФНО также является индуктором апоптоза и воспринимается рецепторами, по структуре напоминающими Fas. Цитоплазматический фрагмент Fas и ФНО-рецепторов содержит домен «смерти», транслирующий апоптозный сигнал на внутриклеточный аппарат апоптоза [Аббасова С.Г. 1997; Барышников. А.Ю. 2002; Дмитриева Е.В. 2003; Akshay K.V. 1997; Bellgrau D. 1995; Banner D.W.1993; Galle P.R. 1995].

В тоже время вирусные белки способны оказывать иммуносупрессивное действие, направленность которого может быть связана как с клеточным иммунитетом, так и с нарушением синтеза цитокинов и снижения апоптической активности зараженных клеток [Alonso С.L. 2004; Ambar B.B. 1999; Hardwick J.M. 2001; Hoetelmans R.W. 2000]. В вирусном генетическом материале закодированы вещества, которые и по строению, и по функции очень похожи на клеточные антиапоптозные белки-регуляторы (Bcl-2) [ Gross A. 1999; Guo В. 2001; Hsu Y.-T. 1997; Huang D.C. 1997; Ilyas M. 1998; Johnson A. L. 1999; Liang Y. 2002]. Особенно актуальной является проблема развития процесса вирогении в случае таких хронических вирусных инфекций как вирусные гепатиты В, С, герпетические инфекции, когда, несмотря не отсутствие активной репликации вируса, клетки макроорганизма «заражены» геномом вируса. Перспективной задачей современной иммунологии является поиск путей модуляции механизма работы клеток в направлении регуляции апоптоза.

Целью исследования было изучение маркеров апоптоза в сыворотке крови и других биологических жидкостях при хронических вирусных инфекциях с высоким онкогенным риском.


  1   2   3   4   5   6   7   8   9   ...   15

  • Государственный заказчик Федеральное агентство по образованию От имени Приемочной комиссии
  • Исполнитель: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кабардино-Балкарский государственный университет им. Х.М. Бербекова»
  • Проект: «Молекулярные основы регуляции программированной гибели клеток при хронических онкогенных вирусных заболеваниях»
  • Руководитель организации: ______________________Б.С. Карамурзов м.п. Руководитель проекта: ________________________ А.А. Шевченко
  • Согласовано: Управление научных исследований и инновационных программ